1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献） 1.1研究意义番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus,TSWV）属于布尼亚病毒（Bnuyaviridae）科，是该科中唯一能侵染植物的一个病毒数。其引起的病害在世界范围内广泛流行，包括热带、亚热带和温带地区，能侵染大多数农业和园艺作物，包括烟草、蔬菜和花卉，引起多种重要作物发生严重病害，导致世界范围内重大农业经济损失[1]。目前，是世界十大农业病害之一，每年造成农作物经济损失约$1000000000，在国际上深受重视，同时也是中国进境检疫有害生物之一。本实验采用分子生物技术，通过构建载体，注射农杆菌，观察过敏性坏死反应的一系列操作，对番茄抗性基因所对应的无毒基因进行了研究，以期确定抗性基因所对应的番茄斑萎病毒的无毒基因，以便更清楚地了解TSWV的基因功能,建立病毒基因组的遗传体系，对之后的遗传育种有深远意义。 1.2国内外研究现状分析番茄斑萎病毒（TSWV）最初是1919年在澳洲发现于番茄，Brillelebank将此命名为斑萎病（Spottedwilt）[2]。该病毒是RNA组成的病毒，粒体直径70-90nm，外面包裹有一层膜。TSWV是这一种族中惟一的一种。同时它也广泛地被称作番茄红素病毒3号小种（Lycopersicon virus 3）[3]。TSWV是物理及化学性质最不稳定的病毒之一，但是当使用含有还原剂的中性缓冲液时，它可以很容易地通过汁液传播[4]。后来几年，斑萎病的传毒介体西花蓟马也被报道[5]。该病毒的寄主范围很广，可侵害160种双子叶植物与10种单子叶植物，尤其是茄科、菊科和豆科的部分植物。番茄斑萎病毒受害症状多种多样[6]。在幼嫩叶片上会出现坏死的同心圆斑和坏死的环带状斑点。起初，叶斑为黄色，而后迅速转为红褐色。从幼苗到成熟的烟株都可能受害。病株会出现发育不良，顶芽脱落或弯曲。受害新叶单侧经常因叶片生长不平衡而发生扭曲或皱折。沿茎秆会出现坏死条纹，茎的表皮和髓部可能出现暗色的坏死区域或空洞，而病株很难收获到可调制的叶片。 番茄斑萎病毒为RNA病毒，其基因组为三分体基因组，其中ssRNA-L为负义，ssRNA-M和ssRNA-S为双义。番茄斑萎病毒的L片段编码一个多聚酶；M片段的互补链RNA编码两个糖蛋白Gn和Gc，病毒链RNA编码非结构蛋白NSm；S片段的互补链RNA编码外壳蛋白N[7]，病毒链RNA编码非结构蛋白NSs[8]。NSm蛋白在病毒系统侵染中起到胞间运动作用[9]，NSs在寄主细胞中可形成拟结晶状或纤维状内含体，其功能未知。GN／Gc基因与病毒装配和蓟马传播病毒特性相关。抗病基因SW-5是 Sergio H. Brommonschenkel等人利用图位克隆从番茄中克隆得到，SW-5b已被鉴定是具有功能的基因拷贝，能抗番茄班委病毒，据蛋白预测表明SW-5是细胞质蛋白[10]。 1.3应用前景通过此课题的研究，能够确定番茄抗性基因SW-5b所对应的无毒基因，这就有助于进一步明确基因组的功能，同时对之后抗性基因与无毒基因互作机制的深入研究有帮助，并且对遗传育种有着深远意义。
参考文献：
[1]Scholthof, K.B.G.,Adkins, S.,Czosnek, H.,Palukaitis, T.et al.(2011) Top 10 plant viruses in molecular plant pathology. Mol. PlantPathol.12,938954.
2. 研究的基本内容和问题
2研究的目标、内容和拟解决的关键问题
2.1研究目的
通过对抗性基因SW-5b所对应的无毒基因的确定，从而能进一步进行抗性基因与无毒基因互作机制的研究，为日后的遗传育种打下基础。
3. 研究的方法与方案
3研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
3.1研究方法与技术路线
3.1.1PCR反应体系
4. 研究创新点
4特色或创新之处
4.1在领域上
在番茄斑萎病毒研究中，已陆续有人发现各个蛋白的相关作用，但对于抗性基因与无毒基因互作这一方面研究的人还很少，十分有意义。
5. 研究计划与进展
5研究计划及预期进展
9月1日9月15日查找文献和相关资料，对课题进行初步认识
9月16日9月30日通过师姐的带领，参与实验的设计、操作和分析
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