1. 研究目的与意义
蛋白质是植物中除了生物碱、多糖、皂苷等成分外的另一种重要的天然活性成分,在中药发挥药理药效过程中扮演着重要角色。
研究发现,很多植物蛋白具有抗病毒、抗炎、免疫调节、降血压等药理活性。
随着对活性蛋白理化性质及生物活性研究的深入,有效的活性蛋白分析检测技术的应用显得尤为重要。
2. 文献综述
板蓝根的临床应用与应用开发研究进展摘要:板蓝根作为大宗中药品种之一,具有广泛的生物活性和临床应用范围,尤其对于上呼吸道感染疗效确切。
近几年来,我国流感爆发频繁,人们对板蓝根的关注也持续增加。
针对板蓝根的临床应用、文献发表、专利发明以及药典中关于板蓝根的制剂进行统计分析。
3. 设计方案和技术路线
1. 板蓝根蛋白的提取、分离、纯化称取粉粹过筛后的板蓝根粉末400g,置于2400ml(料液比为1:6)0.01mol/L的磷酸盐缓冲液(磷酸氢二钠-磷酸二氢钠,含0.1mol/LNaCl,pH值7.2)中充分浸润,并于4℃条件下过夜搅拌浸提,6000r/min离心15min后收集上清液,所得滤液即为板蓝根饮片蛋白粗提液。
用40%-60%的硫酸铵沉降,浓缩目标蛋白,以利于后续分离。
用柠檬酸缓冲液(20mmol/L,pH值3.0)4℃搅拌透析24h,期间多次更换缓冲液,待所有小分子物质及盐类透析完毕后从透析袋中取出样品,6000r/min离心15min,保留上清液。
4. 工作计划
2.21-2.27 查阅并整理文献资料2.27-3.11 完成开题报告3.11-5.31 进行课题实验6.01-6.10完成毕业论文设计
5. 难点与创新点
本项目应用凝胶排阻色谱法、阴阳离子交换色谱法、SDS-PAGE法、色谱质谱联用技术对板蓝根蛋白进行结构表征;通过观察板蓝根蛋白对病毒感染小鼠巨噬细胞吞噬作用、免疫器官及甘露糖受体水平的影响,探讨板蓝根蛋白对正常小鼠的免疫调节作用,具有较好的中医药理论研究思路和实际应用指导意义。
通过结构与免疫活性的相关性分析,能充分挖掘板蓝根蛋白发挥免疫调节作用的特点和机理。
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