1. 研究目的与意义
随着癌症的发病率逐年提高，对癌症有效的靶向药物也开始慢慢进入大众的视野。
靶向药物一般是具有特异结合功能的蛋白，通常是抗体类以及Fc融合蛋白类，这两类药物具有的共同特征就是都含有Fc区域。
抗体的Fc区域和金黄色葡萄球菌中的Protein A可以进行特异性的吸附，并且在酸性环境下可以解吸附。
2. 课题关键问题和重难点
1.蛋白和Protein A的结合和洗脱蛋白的Fc区域和Protein A可以发生特异性吸附，需要对特异性吸附的条件进行摸索，同时需要对该条件发生吸附的层析调料的结合载量进行测定，以确定最佳的上样条件，否则会导致填料或者料液的浪费。
同时也要对洗脱的条件进行研究，因为酸性越高，也就是pH越低，越会导致蛋白的结构被破坏。
所以需要对层析洗脱的的条件进行摸索。
3. 国内外研究现状（文献综述）
1. 层析在过去的年中,蛋白质组学技术的日益广泛应用,使蛋白质浓缩和脱盐的层析技术得到不断革新。
蛋白质组学通常需要从少量复杂的混合物中富集蛋白质,包括选择性地浓缩特定种类的蛋白质。
由于质谱(MS)和基于抗体检测技术的高灵敏度及可提供详细生化特征的性质,它们在临床诊断、生物药物鉴定以及蛋白质结构与功能的基础性研究等广泛的应用中具有很高的实用性。
4. 研究方案
根据文献记载的纯化方法，经过亲和捕获的Fc融合蛋白可以使用离子交换层析，疏水作用层析，复合模式层析以及其他的层析方法进行精纯，这里将会研究使用阴离子交换层析，阳离子交换层析以及疏水模式交换层析来进行精纯，并且比较不同方法的操作特点以及提纯效果。
5. 工作计划
1.捕获使用不同的Protein A亲和层析填料进行Fc融合蛋白捕获，比较不同型号的亲和填料捕获的载量以及质量。
这里将选取不同厂家的亲和填料进行实验，其中包含进口填料和国产填料，考察填料的载量和洗脱后的SEC纯度。
2.精纯筛选分别使用阴离子交换层析，阳离子交换层析，复合模式层析等层析方法进一步提纯Fc融合蛋白，将考察不同层析填料的载量和纯化后的SEC纯度。
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