FX17蛋白纯化工艺开发开题报告

 2022-09-05 23:01:22

1. 研究目的与意义

哮喘是一种常见的慢性气道炎症性疾病,其患病率以每10年20%-50%的速度增长。

中国哮喘患者约为3千万,发病率正持续增加,且哮喘死亡率高居世界之首。

中至重度哮喘是导致哮喘疾病负担增加和影响生活质量的重要原因之一,迫切需要一种安全有效的治疗药物。

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2. 课题关键问题和重难点

1.层析方法的选择关键是要选择合适的吸附剂和判断产物极性从而选择合适的展开剂。

不同的吸附剂适合不同的产物分子大小。

展开剂的极性选择可以通过样品的试溶解和展开剂的配比来选择搭配,可以依据极性大小来类似判断从而选择合适的比例。

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3. 国内外研究现状(文献综述)

三、文献综述(或调研报告)1亲和层析亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。

所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。

2 低ph病毒灭活低pH可使病毒表面的细胞抗原电荷发生改变,蛋白质的空间结构发生不可逆的变性,从而使病毒丧失与细胞受体结合的能力,不能进入细胞完成侵染,也就是被灭活了。

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4. 研究方案

为开发一种提高FX17蛋白收率及纯度的纯化方法,分别对亲和层析,低ph病毒灭活,阴离子交换层析及阳离子交换层析的四步蛋白纯化工艺进行了条件筛选,亲和层析使用枸橼酸和醋酸洗脱体系比较洗脱后蛋白纯度;低ph病毒灭活使用平台工艺ph3.50,26℃90分钟孵育。

阴离子交换层析使用流穿模式,PB作为缓冲体系检测蛋白纯度,阳离子交换层析使用醋酸及枸橼酸缓冲液体系进行梯度洗脱比较洗脱后蛋白纯度。

通过对不同方法的对比得出收率最高,成本相对降低的层析方法。

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5. 工作计划

上学期安排:第17周:根据老师到企业参与毕业设计。

第18周:确定毕业论文课题,查阅相关文献,撰写开题报告。

下学期安排:第1-5周:在熟悉选题的基础上,依据选题的具体内容,进入实验工作。

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